膜片钳电生理学

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膜片钳电生理学

膜片钳技术是一种用于了解离子通道行为的通用型电生理学工具。每个细胞都表达离子通道,但通过膜片钳技术进行研究的最常见细胞包括神经细胞、肌纤维、心肌细胞和高表达单一离子通道的卵母细胞。

为了评估单个离子通道的传导性,微电极与细胞膜会形成高电阻封接,并移除包含目标离子通道的细胞膜片。或者当微电极密封至细胞膜上时,此细胞膜片会破裂,从而使电极能够与整个细胞进行电学上的连通。之后施加电压,形成电压钳,并测量膜电流。电流钳也可用于测量细胞膜内外电压(称为膜电位)的变化。可以通过添加化合物阻断或激活通道来改变细胞膜内的电压或电流变化。这些技术使研究人员能够了解离子通道在正常和疾病状态下如何表现,以及不同的药物、离子或其他分析物如何改变这些状态。

使用 Axon Instruments 的膜片钳工作流程

Axon Instruments® 系列产品(包括放大器、数模转换器、软件和核心组件)为膜片钳实验研究提供全面的解决方案。从小的单通道到大的宏观记录,我们优异的仪器都有助于进行全系列的膜片钳技术实验。加用 Axon pCLAMP 11 软件套装可创建一个简化工作流程,从而进行复杂有效的实验,以及生成更高质量的数据。了解更多有关电生理学实验室设置的信息 >

膜片钳电生理学

  1. 准备溶液 – 配置内液和外液。调整渗透压和 pH 值。
  2. 准备细胞或脑片 – 准备培养细胞、分离神经元、脑片或整体动物。
  3. 拉制并抛光玻璃微电极 – 准备记录电极。拉制玻璃毛细管并抛光电极尖端。
  4. 设置灌注系统 – 设置灌注系统和数据采集软件。确保系统处于屏蔽状态。
  5. 钳制细胞 – 使用显微操作器控制玻璃微电极接触细胞膜。确保已形成高阻电密封。
  6. 信号记录和放大 – 将对信号进行放大。为了获取理想结果,请确保您使用正确类型的放大器进行研究。
  7. 信号数字化 – 然后将模拟信号数字化,以便对信号进行分析。
  8. 数据采集和分析 – 使用 pCLAMP 11 软件套件,可编程更长和更复杂的实验步骤以实现更快的数据分析和准确测定。

了解有关电生理学实验室设置的信息

了解更多有关膜片钳技术的信息,从单通道到全细胞再到胞外场电位记录。

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